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LightSpeed 超快速限制性内切酶 XhoI
产品编号 : HTNP1060
描述 :
规格 : 500T
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HTNP1060-1盒 500T
¥225.00

产品简介:

超快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在 5~15 分钟内精确完成 DNA 切割的限制性内切酶适用于质粒 DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。快速内切酶具有如下特点:5~15 分钟内即可完成酶切;共用一种酶切Buffer,大大简化酶切反应体系;良好的酶活冗余度轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外,去磷酸化、连接试剂在酶切 Buffer 中具有100%活性,支持一管化反应,操作更加方便。

 

产品组成:

组分

规格

XhoI

10× Buffer

10× Color Buffer

500μL

3*1mL

3*1mL

 

保存条件:-20℃保存。

 

注意事项:

1.内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存;

2.仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内

3.为了您的安全和健康,请穿戴好个人防护装备和服装进行操作。

 

使用说明仅供参考:

1.DNA 快速酶切流程

在冰上按如下建议的加样顺序配制反应体系:

 

质粒DNA

PCR产物

基因组DNA

ddH2O

10× Buffer 或 10× Color Buffer

反应底物(DNA)

XhoI

Total

15μL

L

Lup to 1μg)

L

20μL

16μL

L

10μLup to 0.2μg)

L

30μL

30μL

L

10μLup to 5μg)

5μL

50μL

 

注意:体系适用于经过纯化的 PCR 产物酶切。未纯化的 PCR 产物具备一定的离子强度,10× Buffer 加入量可适当减少至 2μL。但由于 DNA 聚合 酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对 PCR 产物进行纯化。

②轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;

37℃温育15min(质粒),或 15~30minPCR产物),或 30~60min(基因组DNA);

80℃温育20分钟即可使酶失活,停止反应(可选)

 

2.双酶切或多酶切

①每种超快速内切酶的用量为 L,并根据需要适当扩大反应体系;

②所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10

③如果所用的几种超快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度

较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。

 

3.适用于质粒的扩大反应体系

质粒DNA                                 1μg         2μg        3μg         4μg        5μg

XhoI                                     1μL         2μL        3μL         4μL        5μL

10× Buffer 或 10× Color Buffer         2μL         2μL        3μL         4μL        5μL

Total                                    20μL        20μL       30μL        40μL       50μL

注:如果总反应体系大于 20μL,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。

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